“好，WB好好跑。”袁威宏交待，仿佛是在给方子业暗示，方子业在做什么，他都了然于心。</p>
方子业点了点头，加快了脚步。</p>
做实验、搞钱、发文章、学识点，充实且快乐。</p>
WB是缩写，蛋白质免疫印迹(WesternBlot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。</p>
一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。方子业研究的HK2，其实就是生物化学糖酵解过程中的第一個限速酶己糖激酶，而HK2则是己糖激酶的缩写，己糖激酶是催化己糖使之磷酸化的酶，它是糖酵解途径的第一个酶，也是糖酵解途径的绝对限速酶。</p>
众所周知，糖酵解是糖转化为能量的第一步，没有糖酵解的第一步，葡萄糖和果糖想要被正常利用，是几乎不可能的事情，而如果依靠酮体等旁路作为有氧氧化的底材，肯定无济于事。</p>
因此定量检测HK2的含量，在骨巨细胞瘤经过过表达、沉默后的绝对数量，是检测HK2在骨巨细胞瘤发展过程中作用的一个定量证据。</p>
WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。</p>
经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分……</p>
原理听起来颇为复杂，但其实真正要操作的时候，主要的步骤主要是以下几步。</p><div id='gc1' class='gcontent1'><script type='text/javascript'>try{ggauto();} catch(ex){}</script>